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2020/12/21 12:03:21

選用凈信組織研磨儀研磨小鼠皮膚組織高效提取RNA

來源:上海凈信

在制作小鼠皮膚組織樣品的時候,會發現皮膚組織韌性特別高。皮膚富含纖維組織和彈性,要從這類組織有效提取RNA是非常困難的,因此完全研磨這些組織是十分具有挑戰性的。傳統的人工或用手持式勻漿器來研磨不僅費時,研磨后的效果也不盡人意比較差,RNA產量低且令樣本發熱,那么使用組織研磨儀會有什么不同的效果呢?

大、小鼠皮膚組織提取DNA、RNA是目前各高校實驗室的一項難題。溫州醫科大經過多個品牌試用比較后選擇上海凈信研磨儀來處理小鼠皮膚組織。本次實驗對象為小鼠去毛后處理過的皮膚,要求磨細一點,提高RNA的濃度,涉及到RNA提取還需要低溫研磨,因為有提取液,所以溫度不能太低,否則凍住液體無法研磨,

實驗步驟:

1、準備金屬適配器一套,離心管和研磨珠若干。

2、預冷模塊,把金屬適配器放到液氮或冰箱中預冷(不用的時候順手把模塊放入-20冰箱,即可省去預冷步驟)

3、取適量小鼠皮膚組織、研磨珠、提取液一起放入離心管中,每管加三到五顆研磨珠,蓋子蓋上。

4、將完成預冷后的金屬模塊取出,放入研磨儀中固定(適配器底部與軸的卡槽互相卡牢)放平后將離心管分別放入適配器對應孔位,(注意平面配平,對稱放樣)蓋上適配器蓋,旋緊螺帽。

5、設置好參數(根據組織類型以及量微調),開始研磨。

6、磨好后打開儀器取出離心管,即可進行后續實驗。

(皮膚組織裝管圖和研磨效果圖)


上圖為2-3分鐘的研磨效果,已經完全研磨完成。之前所有樣品都是人工處理,小鼠皮膚樣特別難磨,磨出來效果很差,RNA提不出來,所以選用凈信組織研磨儀代替人工處理。效率高,效果好,很好的解決了老師的問題。

注意事項:

1、按照組織的種類和量來選擇研磨珠能達到好的效果,有不清楚的及時問上海凈信銷售人員。

2、往金屬適配器里放離心管時注意平面配平,保證適配器壓蓋在水平線上。

實驗選用儀器: 全自動樣品快速研磨儀 JXFSTPRP-24

JXFSTPRP?系統與目前已有的其它樣品制備方法相比,具有通用性廣、高效靈活的優點。該系統避免了研磨、勻漿、超聲波處理等傳統方法的費力、耗時、低效等諸多缺點,可以高效、快速、穩定地裂解并純化各種類型樣品的核酸與蛋白。